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中心实验室介绍:

中心实验室是所院根据世界先进医疗机构的组织架构和形式,在资源共享及创建一个能提供更多交流与合作平台等理念下,投入人力和资金,重点打造的新型实验室。

目前我科有中工作人员10名。两个已建成的平台:实验病理平台及流式细胞术平台;两个正在建设中的平台:蛋白质平台及生物信息平台。中心实验室现拥有微阵列扫描仪,双向电泳系统,梯度PCR仪,紫外分光光度计,电子显微镜,荧光显微镜等,还配有组织细胞培养室和较宽敞的实验室空间。除了硬件设施外,我们还提供仪器及技术的支持。

中心实验室不仅面向基础科室,也面向临床科室及所院外单位开放。中心实验室将重点加强面向临床的实验室的建设,使广大的临床医师和研究生在开放实验室顺利地完成课题,并将研究成果运用到临床工作中。我科结合自身的优势,积极探索与临床相结合的道路,使中心实验室成为连接科研与临床的桥梁。我们也将积极地寻求广泛的交流与合作。

提供服务内容

一、流式细胞术

中心实验室应用流式细胞仪开展基础研究和临床检测工作,面向全院所各个科研部门及临床科室。我们将提供的科研合作空间和质的服务。

1、分析测试条件

-浓度约10万-100万个细胞/ml,体积>0.5ml。

-激发光(Laser)波长488nm、633nm两种可选,功率15-100mW。

-同一样本可同时检测四种不同波长的荧光(440nm,480nm,525nm,575nm,610nm,675nm)。

-流式细胞仪型号:CoulterEliteESP

-免疫荧光:CoulterElite4.5,Immuno-4,MultiGraph

-DNA分析:CoulterElite4.5,MultiCycle2、流式细胞仪应用:

1)临床肿瘤病人实体瘤组织的DNA倍体分析,发现癌前病变,协助肿瘤早期诊断。非倍体细胞与肿瘤恶性程度有关;异倍体肿瘤恶性病变的复发率高、转移率高、死亡率也高,而二倍体及近二倍体肿瘤的预后则较好。

2)淋巴细胞亚群的测定:淋巴细胞的机能状态在一定程度上反应了机体的免疫机能。用FCM来测定某些疾病的淋巴细胞及其亚群已成为,要的诊断和预后判断的指标,如对骨髓、器官移植,白血病、淋巴瘤的诊断和对免疫缺陷病的估价等。

3)淋巴瘤的表现型测定B细胞的临床指证,在诊断方面,FCM与单克隆抗体结合,可以弄清这些肿瘤的免疫起源,特别是分清B细胞性、T细胞性或骨髓性肿瘤。

4)基础方面可以进行细胞周期、凋亡、细胞因子及各种免疫荧光的检测及相关实验;提供试剂(按成本收费)。

3、已开展工作:

1)造血干细胞流式细胞仪测定(CD34)

2)肿瘤组织DNA倍体分析(流式法)

3)T细胞亚群Th1.Th2细胞检测(流式法)

二、蛋白质平台

配备2-D胶电泳系统,其中IPGphor等电聚焦电泳仪、EttanDALTII大规模垂直电泳系统(美国安发玛西亚公司)等仪器。新型、水平式的IPGphor为日趋炽热的蛋白质组(Proteomics)研究提供快速、简便、高重复性、高分辨率的蛋白分析。第二向电泳能大规模、高通量、高重复性地鉴别分离可定量蛋白质斑点。

1、IPGphor等电聚焦电泳仪特点:

简化操作

胶条槽的设计:胶条槽使预制胶条的处理减至少:只需将未经处理的干胶条放在条架内,加上含样品的缓冲液,便可开始电泳。胶条的浸泡、上样及等电聚焦电泳可一步完成。

编程:电泳的编程可利用仪器前面的轻触式键盘,方便地编辑胶条浸泡的时间、电泳的电参数、电流及温度。仪器一共可编辑9个程序,每个程序含9个步骤。

快速完成电泳

工艺放大:IPGphor一次多可跑12个IEF胶条电泳,配合EttanDALTII大规模垂直电泳系统,能于1.5天内一次完成12个样品的蛋白双向电泳。

高压输出:IPGphor内置电源,能输出高达8000v的高压,使电泳时间缩短至2小时,比传统所需的时间快5倍。

2、EttanDALTII大规模垂直电泳系统简介

*为大规模、高通量、高重复性双向电泳第二向SDS-PAGE专门设计

*可同时进行12块26x20cm板胶电泳,适于长至24cm

*的温控和程序化电源控制运行的高度重复性

*内置半导体温控(15-50度)及蠕动泵提供的缓冲液循环系统,4-6小时即可完成电泳

*兼容预制胶和自制胶(预制胶由配套胶盒和非连续缓冲液试剂,缩短电泳时间;EttanDALTII灌胶模具,可同时灌制14块胶)

*系统设计将所需缓冲液消耗减至低。

3、图像扫描仪(ImageScanner)

为了对考玛斯亮兰染色和银染胶可靠定量,ImageScanner具有极宽的光密度范围以满足高灵敏度扫描的需要。具有分辨率高和扫描时间短的优点。同时也可为临床和科研科室提供图片和文件扫描服务。

4、ImageMaster分析软件和数据库

ImageMaster分析软件能全自动准确地进行斑点检测和差异分析。ImageMaster分析软件与ImageMaster数据库配合,能对大量2-D胶进行分析和比较。

1)ImageMaster2-DElite软件

*化的斑点检测

*可做多达100块胶的快速准确拟合

*不限制凝胶数目做全自动比较

*背景消除方法补偿凝胶内的不均匀度

*平均胶方法用于补偿胶间的误差

*在用户定义的范围内识别表达水平的差异

*通过软件自制网页,便于结果的交流

*访问外部网络数据库

2)ImageMaster2-DDatabase数据库软件

*用户定义问题指令

*用相同的表达模式识别斑点

*数据存储在定型数据库中

*用统计方法做凝胶比较

*访问外部网络数据库做进一步比较

三、基因微阵列扫描仪(microarray)

配备一台基因微阵列扫描仪(Agilent,G2565AA型),扫描仪为目前世界上较先进的基因芯片扫描仪,具有信号相互干扰小、灵敏度高、结果稳定、25mm×75mm玻片规格,方便灵活,且具有能装载48枚玻片的转盘设计,自动化程度高等特点。图像解析软件内置误差分析模块及先进的统计学处理等优化功能,使微阵列的分析和图像解析高效、快捷,利用此扫描仪的基因芯片技术可以在疾病诊断、药物研究筛选、基因表达分析、基因突变的确认、基因分型及新基因的发现等领域应用。(此扫描仪支持的染色Cy3,Cy5,Alexa555,647和660dyes)

四、实验病理

配备莱卡切片机、昂丽亚冰冻切片机、莱卡自动染色机、樱花包埋机、杜邦超薄切片机、飞利浦透射式电子显微镜及暗室等仪器和设备。

主要为科研、临床和教学提供组织包埋、病理切片、HE染色、免疫组化、冰冻切片、电镜标本包埋、半超薄切片/超薄切片、暗室技术、电镜科研超微观察及电镜临床诊断服务。

本室病理主治医师可为科研提供病理诊断服务。

五、肿瘤动物实验项目

1肿瘤抑制率%

2肿瘤生长曲线

3荷瘤鼠生命延长率%

4肿瘤放疗增敏实验

5肿瘤化疗增敏实验

6肿瘤转移抑制率%

7鼠肾被膜肿瘤移植抑制率%

8急性毒性LD50

六、中心配备如下基本实验设备

*超速离心机

*去离子水

*超净台

*冷冻干燥机

*碎冰机

*-70度冰箱

*动物药理实验数据处理软件

*PCR仪

*液氮冷冻罐

*蒸馏水*紫外分光光度计

七、开放实验室平台

有高、中级科研人员四名。配备有标准的无菌室和实验室。可为临床和基础科研提供细胞培养、蛋白质提取、DNA分析和实验指导等系列服务,为临床和基础科室及相关课题组提供实验场地和基本的实验仪器和设备。尤其欢迎临床医生自带小课题到我室进行研究工作或者外联项目进行合作。另外,我室可在临床医生申请课题前就研究方向、内容上提供力所能及的帮助或者联合申请。

为临床和基础科室及相关课题组提供基本的实验仪器和设备及相关服务。

八、仪器设备维修

本实验室具有维修部分实验仪器,如离心机、二氧化碳培养箱、分析仪器、摇床、显微镜等设备的能力。

九、开放会议室

配备有会议用桌椅,可供20人举行会议和举办学术讲座。

中心实验室为公共服务平台,上述服务项目面向院内、外单位。欢迎来人来电洽谈。

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中心实验室门诊时间表:

门诊类型:普通门诊专家门诊特需门诊夜间门诊

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